Countstar Rigel在干细胞研究领域中的应用

发布日期:2020-09-07 09:25:00浏览次数:187

一、干细胞的分类

干细胞(stem cell)是一类具有多向分化潜能和自我复制能力的原始的未分化细胞,是形成哺乳类动物的各组织器官的原始细胞。根据其分化潜能,可以分为:
①全能干细胞:可分化成人体的各种细胞,从而组成各种组织和器官,最终发育成为一个完整的生物体(受精卵);
②亚全能干细胞:是人体发育过程中存留于多种组织中的,其分化能力接近于全能的成体干细胞;
③多能干细胞:具有分化多种组织的潜能,但失去了发育完整个体的能力(间充质干细胞);
④专能干细胞:由多能干细胞分化而来,只能向一种类型的细胞分化(肝脏干细胞等)。

1.干细胞图片(摘自网络)

二、干细胞的特性

①自我更新

干细胞可以通过自我复制,产生与亲本完全相同的子代细胞,以保持干细胞数量的恒定,可通过分裂维持自身细胞的特性和大小;

②多向分化

干细胞在一定条件下可以进入分化程序,可进一步多向(或定向)分化为逐步成熟的次级子代细胞,最终形成功能特异的组织细胞,在组织修复和新陈代谢中起重要作用;

③自动归巢

干细胞在体内定向迁移至特定的组织部位,在不同环境的诱导下,依赖性地分化为特定的组织细胞;

④自动免疫性低

脐带、胎盘来源的干细胞表面抗原不明显,免疫原性低,不存在免疫排斥的特性;

三、干细胞治疗的原理

①替代修复死亡和受损的细胞

②激活休眠和处于抑制状态的细胞

③旁分泌作用(分泌神经营养因子、抗凋亡因子等);

④促进细胞间电能力、电传导的恢复,如间充质干细胞分泌连接蛋白帮组细胞间连结、促进离子通道的开放等

四、干细胞移植的优点

五、干细胞制剂的制备工艺流程

六、干细胞企业质量控制策略(MSC)

七、干细胞质控过程中的痛点

干细胞产品的安全性监测贯穿于产品研发到生产的全过程。

八、Countstar Rigel 在干细胞研究过程中的应用

无论是对脐带血样本进行检测以筛选单核细胞,还是对纯化培养的干细胞,又或者是检测冻存复苏的干细胞制品,Rigel 都可以排除杂质干扰,进行稳定准确的判断。

2. A.明场图片;B.Rigel 荧光图片

Countstar Rigel可以对干细胞运输前后进行活率的精准计数,传统方法台盼蓝计数对运输后状态不佳的细胞活率无法精确检测,Rigel可以很好地解决这个问题。

3. 脂肪干细胞运输前后活率检测

美国药典(USP/NF)也指出,复苏的细胞样本活率评估,台盼蓝检测方法用的越来越少,因其很难分辨死的细胞和解冻的细胞;荧光检测方法使用的频率越来越高。


干细胞治疗中,要保证干细胞的纯度,排除免疫细胞等的干扰,可以通过Rigel对干细胞表面的Marker进行检测。同时为了保证干细胞的均一性,可以用Rigel对干细胞的形态学进行检测。干细胞随着传代次数和运输,会发生形态学的变化,如直径结团率等。Rigel可以通过检测干细胞表面相关Marker,坚定干细胞的纯度

4.

A.干细胞形态学的变化

B.Marker CD105检测及分析(Rigel 拍摄)

根据国际细胞治疗协会(ISCT)提出的间充质干细胞(MSC)标志物,MSC的常用阳性指标是CD73、CD90、CD105,阴性指标是CD45、CD34、CD14、CD11b、CD19等。Countstar Rigel 可以对CD90、CD105、CD45、CD34等多个指标进行检测并用类流式软件FSC软件进行分析。

5. A. FSC软件分析结果 B.Rigel 所摄图片

Countstar Rigel 细胞分析仪